预期用途:
活检培养液是用于预植入遗传诊断(PGD/S)的早期胚胎的卵裂球活检。
使用方法:
第2天(收集卵后 2 天)
1.将 1-2mL 活检培养基置于培养皿中,用预平衡的液体石蜡覆盖,并在 5-6%CO2 环境中平衡至 37℃,至少 2 小时。
第3天(胚胎活检日)
1.在受精后第 3 天早晨,进行早期胚胎活检。
2.活检前半小时,为每个胚胎准备活检盘。用 10×10μL 活检培养基冲洗吸头的尖端。吸取三滴活检培养液和一滴 精子显微操作液。
3.立即用 4mL 预平衡的石蜡油覆盖培养皿,以避免蒸发,并将制备的培养皿在 5-6%CO 2 环境中温热至 37℃。同时准备胚胎培养基的微滴,用于在诊断时进行胚胎的洗涤和最终培养。
4.取预平衡的培养皿并将胚胎转移到培养皿的中间小液滴中。用活检吸管吸取精子显微操作液液滴,以避免胚胎粘附在移液管上。
5.执行透明带激光打孔操作。
6. 获得透明带小孔后,则使用取样吸移管接近卵裂球。为了使质量减少最小化,将一个或两个最小的卵裂球进行活检并放置在相应的活检培养基小滴中。
7.活检后立即将胚胎在几滴/孔的囊胚培养基之间转移来彻底洗涤胚胎。
8.最后将胚胎转移到具有用预平衡的液体石蜡覆盖的胚胎培养基的微滴/孔的新皿中。
9.将具有分离的卵裂球活检皿,用于样品制备。
10. 同样的可进行第五天的囊胚活检。