本产品已在美国专利商标局(USPTO)注册,专为玻璃化而设计,在人类辅助生殖技术中用于解冻卵子、不同阶段的胚胎和生殖组织(卵巢和睾丸)。
使用方法(微滴法):
1.将解冻液(TS)、稀释液(DS)和洗涤液(WS)从2-4℃冰箱中取出,平衡至室温(23-27℃)。
2.使用之前,取约300 µL 的TS至已标记的冷冻解冻板或者组织培养皿中预热至37℃。
3. 在无菌室温条件下,取DS和WS溶液各两滴(每滴50-100μL)分别置于冷冻解冻板或者胚胎培养皿(3002)中,分别记为DS1、DS2与WS1、WS2(见图2)。
4.从液氮罐中取出装有患者信息载杆的铝架,放置在一个盛有液氮的聚乙烯泡沫盒或其他容器中,使iVitri®-straw或-EZ载杆完全浸没在液氮中,并核查标签上患者的信息。
5.用长镊子夹住iVitri®-straw或-EZ载杆主体,并将其从铝架中取出。
6.用长镊子夹住载杆套并拉出,此过程始终在液氮中进行。
7.迅速从液氮中取出iVitri®-straw 或-EZ载杆的杆体(标志面朝下),在显微镜载物台或层流工作台上,面朝下置于预热的TS液滴中,于37℃条件下平衡1分钟(图1),然后将卵母细胞或胚胎从TS转移至DS1和DS2中分别平衡2分钟(图2)。
8.将卵母细胞或胚胎从DS转移至WS1和WS2中,分别放置2分钟(图2),然后在培养基中洗涤一次,放入培养箱中培养。
补充说明:
若卵母细胞解冻时,需增加以下两步操作:
1) 在TS解冻之后,将卵母细胞置于TS: DS(1:1)混合液滴中平衡3 分钟。
2) 在DS第二次平衡之后,将卵母细胞置于DS:WS(1:1)混合溶液中平衡2分钟。
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