本产品已在美国专利商标局（USPTO）注册，专为玻璃化冷冻而设计，用于人类辅助生殖技术中冷冻卵母细胞、不同阶段的胚胎和生殖组织（卵巢和睾丸）。

使用方法（23-27℃）

1.将平衡液（ES）和冷冻液（VS）从2-4℃的冰箱中取出，平衡至室温（23-27℃）。

2.准备好液氮容器并确保内部的液氮有足够的深度来浸没冷冻支架，放置于显微镜附近。

3.将患者必要的信息标记在每个无菌冷冻解冻板或者培养皿（falcon 3002）和iVitri^®-straw或-EZ载杆上。

4.在无菌操作下，取两滴ES溶液（每滴50-100μL）分别置于冷冻解冻板或者培养皿的上半部分（如图1所示），分别记为ES1和ES2。 

5.将卵母细胞或者胚胎转置于ES1中6分钟，移动卵母细胞或者胚胎一次，然后将细胞在ES2中再平衡6分钟，不可扰动。（注意：卵母细胞或胚胎会收缩，然后逐渐恢复到原始大小，表明平衡完成。对于卵母细胞，可根据需要将ES 稀释成不同的浓度。）

6.在上述ES平衡期间，无菌条件下取两滴VS溶液（50-100μL）分别置于冷冻解冻板或者同一培养皿的下半部分（图1所示），记为VS1和VS2。

7.将卵母细胞和胚胎以最小体积的液滴从ES2转移至VS1中静置30秒，然后再置于VS2中30秒。

8.将iVitri^®-straw或-EZ载杆放在显微镜下（iVitri^®标志朝上），然后调整焦点于顶部的黑色标记处，再把卵母细胞或胚胎（1〜3个）置于黑色标记附近，同时去除过量的冷冻液，使所含冷冻液体积保持最小（0.2μL）（图2），黑色标记使加载杆套更容易。

9.握住IVitri^®手柄端，将iVitri^®-straw或者-EZ载杆迅速地插入到新鲜的液氮中（图2）。

10.用长镊子（非手术钳）夹住载杆套，将其插入液氮中直到停止起气泡后，盖入载杆并轻轻拧紧，注意不要将iVitri^®-straw或-EZ载杆从液氮中取出。

11.将iVitri^®-straw或者-EZ载杆放在冷冻支架中，使其载杆套端朝下并储存在液氮中。

 补充说明

若冷冻卵母细胞时，需提前将卵子置于HEPES（含12mg/mL rHSA）和ES（1:1）混合液滴中平衡4分钟。